第一節 無菌操作過程
預備實驗

Ⅰ. 開始實驗前
  1. 服裝:穿上實驗袍,戴上即棄膠手套,以保護衣服和雙手。
  2. 清潔雙手:用肥皂徹底清潔雙手。
  3. 傷口:用防水物料包裹皮膚上的任何傷口。
  4. 門窗:關閉門窗,減少空氣中的微生物隨風進入培養物中。
  5. 工作區:用消毒劑(70% - 75% 酒精,或 10% 漂白水,或 10% 氯酸鈉)清潔桌面和儀器。

Ⅱ. 預備培養基

把培養基、含有培養基的試管或燒瓶進行滅菌處理。把它們放入高壓滅菌器,以壓力 103 kPa,溫度 121 °C 的蒸汽下加熱至少 20 分鐘,殺死裡面所有的微生物,並破壞細菌和真菌的孢子。

無菌操作預備實驗
進行實驗

Ⅲ.接種至培養基
  1. 把微生物移入培養基的過程稱為接種。金屬接種環常用於培養接種或轉移微生物到瓊脂板上。在接種前及接種後,必須把接種環置於火焰上燒紅,以進行滅菌。
  2. 打開或關閉載有微生物培養的試管或燒瓶時,必須用火燒試管口或燒瓶口以滅菌。此舉亦能防止空氣中的微生物落入試管或燒瓶中。
  3. 培養皿中的培養基必須保持覆蓋,避免空氣中的生物飄落到培養基中。進行接種時,以最小幅度掀起培養皿的蓋子,接種環剛可以進入便足夠,然後迅速把蓋子放回,這樣有助降低空氣中的微生物進入培養物的機會。

Ⅳ. 培植劑觀察培養物
  1. 培養物必須牢固密封,避免溢出。除接種及提取最終產物的時候外,培養物應保持密封。
  2. 培養皿應倒置擺放,避免凝結在蓋子上的液體掉落在瓊脂表面,影響菌落的生長。

無菌操作實驗
意外及實驗後的處理

Ⅴ. 若發生意外
  1. 若不慎發生微生物洩漏或打碎了培養器皿,應以消毒劑覆蓋任何洩漏物或破損的培養器皿,並蓋上即棄紙巾。
  2. 10 分鐘後,把所有物料放進高壓滅菌器膠袋,進行高壓滅菌或焚化。
  3. 以消毒劑再次清理有關區域。
  4. 清理洩漏物時,必須穿上實驗袍並戴上即棄手套。
  5. 向老師報告洩漏事宜。

Ⅵ. 完成實驗後
  1. 以消毒劑清潔工作枱表面,並為所有設備進行滅菌。
  2. 把所有培養物和污染物丟棄入高壓滅菌膠袋,進行高壓滅菌或焚化。
  3. 用肥皂徹底清洗雙手,清洗實驗袍。

發生意外或完成實驗後,把培養物或污染物進行高壓滅菌
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